ПЦР – сверхчувствительная диагностика инфекций

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – один из самых новых и точных способов диагностики. В 1993 году за его разработку учёный Кэри Муллис получил Нобелевскую премию. Высокотехнологичные лабораторные методы диагностики дают возможность выявить множество заболеваний на самых ранних стадиях. И, если ранее для получения результата необходимые и срочные анализы медикам Лесного приходилось доставлять в Екатеринбург или Пермь, то сейчас нужные исследования для постановки более точного диагноза можно получить на месте и в кратчайшие сроки.

Новейшая лаборатория является подразделением клинико-диагностической лаборатории ФГБУЗ ЦМСЧ № 91 ФМБА России. Лаборатория будет заниматься количественным и качественным определением инфекционных агентов в биологических средах человека.

– Рабочая группа трудилась над созданием ПЦР-лаборатории на протяжении трёх лет. Главная задача – снизить нашу зависимость от услуг иногородних лабораторий и быстро определять возбудителя инфекции, а также назначать своевременное этиотропное лечение, – пояснил начальник ФГБУЗ ЦМСЧ № 91 ФМБА России Виктор Мишуков. – В дальнейшем мы сможем определять вирусные гепатиты, планируем рассмотреть вопросы по туберкулёзу и заниматься верификацией биологических агентов при заболеваниях, передающихся половым путём. Планируем, что с середины декабря мы самостоятельно начнём делать необходимые анализы, не прибегая к услугам иногородних лабораторий.

Также он рассказал, что дорогое оборудование, строительство и оснащение лаборатории (а это порядка 3,5 млн. рублей) были выполнены за счёт средств, полученных ФГБУЗ ЦМСЧ № 91 ФМБА России от внебюджетных доходов. Однако главная задача ПЦР-лаборатории – не коммерческая деятельность, а выполнение мероприятий, связанных с безопасным переливанием крови и кровезаменителей, а также выполнение порядка оказания медицинской помощи больным с ВИЧ-инфекцией.

– ПЦР – очень высокотехнологичный метод, требующий соблюдения строжайшей дисциплины – все его этапы должны быть чётко выполнены. Если пропустить хотя бы один, диагностика может оказаться неверной, – говорит Борис Кожевников, заведующий отделом организационно-методической работы, внутреннего контроля качества и безопасности медицинской жизнедеятельности. – В ПЦР-лаборатории используется оборудование как иностранного, так и отечественного производства, обеспечивающее полную стерильность рабочей зоны. Установлен комплекс специальных фильтров, так как работа идёт с микроорганизмами, и на первый план выходит именно биологическая безопасность. Основной анализатор – амплификатор одновременно может делать 96 исследований. Кроме того, имеется возможность проведения индивидуальных исследований на отдельные инфекции (например, корь или краснуха), когда необходимо установить конкретного возбудителя для тяжелобольных с неясной инфекционной патологией.

Достоинства ПЦР-лаборатории

• Универсальность – ПЦР позволяет обнаруживать любые ДНК и РНК, даже когда бессильны другие методы.
• Специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя, то есть специфичность метода достигает 100%. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа.
• Чувствительность. ПЦР может найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя и определить его.
• Оперативность. Постановка реакции занимает несколько часов, таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет всего один день.
• Определение возбудителя, а не реакции на его внедрение со стороны организма. Таким образом, возможно точно диагностировать заболевание ещё в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни.

Врач клинической лабораторной диагностики Елена Бабичева пускает нас в святую святых и рассказывает, что вся работа проводится в ламинарных шкафах и ПЦР-боксах, которые предназначены для работы с материалами третьей и четвёртой групп патогенности (столбняк, дифтерия, туберкулёз, ЗПП, сифилис, пневмония и другие).

– Мы можем работать с любыми видами биологических материалов (кровь, мокрота, плазма и так далее), – говорит она.

Новейшие технологии позволяют нам уже сегодня определять массу инфекционных агентов в биологических жидкостях человека, даже если там находится их самое микроскопическое количество – буквально единичные клетки бактерий или вирусов.

ПЦР-анализ может выявить у пациента заболевание, как в острой стадии, так и в хронической. Первоочередная задача организации лаборатории – обследование донорской крови на ВИЧ, гепатит B и гепатит С. Далее планируем определять вирусную нагрузку у ВИЧ-инфицированных пациентов, следить за развитием вируса.

Метод ПЦР позволяет диагностировать наличие ряда возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике заболеваний, передающихся половым путём. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) этого сделать невозможно. В отличие от бактериологии, вирус вырастить достаточно сложно, и не каждая лаборатория за это берётся. В ПЦР-лаборатории всё происходит на генном уровне. Код ДНК для каждого вида организма уникален, поэтому ПЦР-метод показывает 100% результат определения заболевания или вируса.